YENİ INNULA VISCOSA EKSTRATLARI VE ARTRİT TEDAVİSİ İÇİN KULLANIMI
BULUŞUN ALANI Bu buluş, Inula Viscosa ve ekstraktları ve bunların kullanımı ile ilgilidir.
BİTKİN TARİHÇESİ Aiton L. botanik rehberi "tıbbi ve mutfak" bitkisi tarafından tanımlanan bitki Inula viscosa (Aiton L.), eşanlamlılar: Dittrichia viscosa (family Compositae). Inula viscosa, Akdeniz havzasında vahşi doğada yetişen çok yıllık bir çalıdır. Inula viscosa türünün üyesi olan bitkilerin, biyokimyasal etkinliğe sahip doğal bileşenlere sahip olduğu bilinmektedir. Inula viscosa özütlerinin, özellikle bitki hastalıklarına karşı, antibakteriyel aktivitesi Y. Cohen tarafından US 6,423,352 ve US 5,853,727'de bildirilmiştir. Debat, J. ve arkadaşları, US 4,254,112'de, enfeksiyöz hastalıkların tedavisinde ve bakteriostatik ve fungistatik ajanlar için Inula viscosa özütleri açıklamaktadır. Inula Viscosa'dan izole edilmiş aktif bir seskiterpen ve antifungal aktivitesi, Neeman, I. ve Maoz, M. tarafından WO 99 / 20,109'da açıklanmıştır. WO 03/017768, hematofagik böcekleri, böcekleri, sivrisinekleri ve at bayırlarını kontrol etmek için bir Inula viscosa formülasyonunun kullanımını açıklamaktadır. Yukarıda belirtilen ekstraktların hepsi ve bunların kullanımı, inula viscosa maddesinin kaynağının standartlaştırılması veya optimizasyonu yapılmadan vahşi ortamda yetiştirilen Inula viscosa bitkileri ve ekstraksiyon işleminde sürdürülebilirlik, öngörülebilirlik, tekrarlanabilirlik ve etkinlik elde etmek için ekstraksiyon işlemi kullanılarak gerçekleştirildi. Standartlaştırılmış, üniform, öngörülebilir ve tekrarlanabilir bir ürünün üretiminde esas olan Inula viscosa bitkisindeki aktif bileşenlerin% 50'sinden fazlasını içerir. Artrit, enfeksiyöz, metabolik veya anayasal sebeplerden ötürü eklemlerin bir iltihabıdır. ABD artrit vakfına göre, bu durum ABD'de engelliliğin önde gelen nedenidir. Durum yaşamı tehdit eden nitelikte değildir; Bununla birlikte, etkilenen derzlerin hareket, ağrı, şişme ve sertlik derecesinde orta derecede şiddetli bir kısıtlama ve böylesi bir durumdan mustarip kişinin fiziksel fonksiyonu ile sonuçlanır. Halen, iltihaplı eklemlere oral, parental veya topikal olarak alınan (veya içine enjekte edilen) sistemik ve topikal tedaviler ve / veya analjezikler kombinasyonu ile tedavi edilir.
BULUŞUN ÖZETİ Mevcut buluş, Inula viscosa özütlerinin artritin neden olduğu semptomları tedavi etmek ve hafifletmek için kullanılabileceği bulunması üzerine kurulmuştur. Ekstraktlar şişlik, inflamasyon ve durumla bağlantılı ağrı azalması ile artrit semptomlarını hafifletir. Dahası, ekstraktların kullanımı, etkilenen derzlerin hareket aralığında bir artışa ve kuvvetlerinde bir artışa neden olur.Etkilenmemiş ve tedavi edilmemiş derzler de olumlu etkilenir. Bu etkilerin tekrar ortaya çıkma sıklığı, bu özütlerin kullanımı ile azaltılır ve / veya engellenir.İlaveten, vahşi tip Inula viscosa bitkisinin ticari olarak dikkatli ve kontrollü şartlar altında yetiştirilen, standart ticaret prosesinde ekstrakte edilebilen bir ürün olarak yetiştirilebileceği bulunmuştur; bu miktar, tekrarlanabilir, Burada özüt içindeki aktif bileşenlerin içeriği karakterize edilir. Elde edilen ekstre mükemmel antifungal, antioksidan ve antibakteriyel özellikler sergiledi. Dolayısıyla mevcut buluş, artrit tedavisinde kullanılmak üzere bir Inula viscosa özütü ile ilgilidir.Artrit, hepsi dejeneratif eklem hastalıkları, artritik olmayan romatizma ve çeşitli artrit olan osteoartrit, romatizmal artrit, psoriatik artrit olabilir. Inula viscosa ekstraktı topikal olarak veya tercihen uygun eksipiyanlar içeren bir formülasyonda kullanılabilir. Formülasyondaki Inula viscosa özütünün miktarı, yaklaşık% 0,1 ila yaklaşık% 95, tercihen yaklaşık% 0,1 ila yaklaşık% 50 ve en çok tercihen% 5 ila% 30 (a / a) arasındadır. Buluş ayrıca, cilt bakımı olarak ve anti-enflamatuar, anti-bakteriyel, anti-fungal, anti-oksidan ve anti-maya olarak ve ayrıca güneşten koruyucu olarak kullanılmak üzere bir Inula viscosa ekstraktı içeren bir formülasyona yöneliktir. Buluş, ayrıca, Inula viscosa ekstraktının optimize edilmiş miktarlarının elde edilmesi için Inula viscosa bitkilerinin ekilmesi ve optimum ekstraksiyona yöneliktir. Ekstrakt, kontrollü koşullar altında önceden belirlenmiş periyotlarda yetiştirilen ekili Inula viscosa bitkilerinin yerden kesilmiş kısımlarının hasat edilmesi ile elde edilir. Hasat edilen parçalar, ekstraksiyon işleminden önce kurutulur, sonuç olarak kuru yaprak biyokütlenin yaklaşık% 5 ila% 8 nem içeriği elde edilir. Kurutulmuş biyokütle toz haline getirmek için öğütülür. Toz tahılın etil asetatla en az bir kez daldırılması, etil asetatın yükseltilmiş sıcaklıklarda buharlaştırılması ve flavanoidler, karotenoidler, tomentosin, seskiterpen laktonlar, saponinler ve sterol içeriği ile karakterize edilen bir ekstraktın elde edilmesi ile ekstraksiyon yapılır.
ÇİZİMLERİN KISA AÇIKLAMASI Buluşu anlamak ve uygulamada nasıl yürütülebildiğini görmek için, ekteki çizimlere referans verilerek, sadece sınırlayıcı olmayan bir örnekle, şimdi tercih edilen bir düzenleme anlatılacaktır; burada: İncir. Şekil 1, bu buluşa göre ekstrakte edilmiş bir Inula Viscosa ekstraktısının HPLC kromatogramını göstermektedir. İncir. Şekil 2, çeşitli seskiterpenler gösteren türevlendirilmemiş Inula viscosa ekstraktının GC / MS kromatogramını göstermektedir (Tabloda verilen miktar tayini
1). İncir. Şekil 3, bu buluşun Inula viscosasının antioksidan aktivitesini BHT ve kersetin gibi ticari anti-oksidan ajanlarla karşılaştırmaktadır. İncir. Şekil 4, bu buluşun bir Inula viscosa ekstraktıyla (görsel analog skala) yapılan bir tedavinin ağrı redüksiyon etkinliğini gösteren bir klinik araştırmanın sonuçlarını göstermektedir. İncir. Şekil 5, bu buluşun bir Inula viscosa özü ile bir tedavinin ağrı azaltma etkinliğini gösteren bir klinik araştırmanın sonuçlarını göstermektedir (Wong-Baker, ağrı derecelendirme ölçeğine bakmaktadır). İncir. Şekil 6, mevcut buluşun bir Inula viscosa özütü ile muamele edilmesinden kaynaklanan etkilenen derzin hareket aralığındaki artışını gösteren bir klinik araştırmanın sonuçlarını göstermektedir. İncir. Şekil 7, bu buluşun Inula viscosa özütü ile muamele edilen şişmenin azaltılmasını gösteren (kasık çapının azalması olarak hesaplanan) bir klinik araştırmanın sonuçlarını göstermektedir. İncir. Şekil 8, mevcut buluşun Inula viscosa özü ile muamele edilmiş eklem mukavemetinde (Palmer tutam) artışı gösteren bir klinik araştırmanın sonuçlarını göstermektedir. İncir. Şekil 9, bu buluşun Inula viscosa ekstraktı ile muamele edilen eklem mukavemetinde (İpucu tutam) artışı gösteren bir klinik araştırmanın sonuçlarını göstermektedir. İncir. Şekil 10, bu buluşun Inula viscosa ekstraktı ile muamele edilen eklem mukavemetinin (Key tutam) artışı gösteren bir klinik araştırmanın sonuçlarını göstermektedir. İncir. Şekil 11, bu buluşun Inula viscosa özütü ile muamele edilen eklem mukavemetinde (Grip tutam) artışı gösteren bir klinik araştırmanın sonuçlarını göstermektedir.
BULUŞUN AYRINTILI AÇIKLAMASI Sözü edildiği gibi, bu buluş, artritin tedavisi için tercihen Inula viscosa'nın bir ekstraktı kullanan Inula viscosa'nın kullanımı ile ilgilidir. Dahası, bu buluşa göre Inula viscosa ve özleri, diğer kullanımlar için doğal bir cilt bakım bileşeni olarak da kullanılabilir. Özellikle, Inula Viscosa ve ekstraktları, anti-inflamatuar, anti-bakteriyel, anti-fungal, anti-oksidan ve maya önleyici olarak ve ayrıca cilt için güneşten koruyuculuk olarak verimli bir şekilde kullanılabilir.Anti bakteriyel ve mantar önleyici özelliklerinden dolayı, doğal bir koruyucu madde olarak da kullanılabilir. Bu buluşa göre Inula viscosa, yaklaşık% 0.1 ila yaklaşık% 95 (w / w) Inula Viscosa içeren uygun formülasyonlarda kullanılabilir. Belirli bir formülasyondaki Inula viscosa'nın kesin miktarı, amaçlanan kullanıma ve uygulama şekline bağlıdır. Inula viscosa sulu bazlı bir formülasyon veya sulu olmayan bir formülasyon olabilir. İstenilen formülasyonun niteliğine bağlı olarak eklenen eksipanlar eklenmelidir. Bu tür eksipiyanların sınırlayıcı olmayan örnekleri arasında Cı olabilir 2 - Cı- 5 -alkoller, en çok tercih edilen doğrusal ya da dallı Cı- 2 -C 4 alkoller, eterler, esterler ve emülgatörler. Sulu olmayan formülasyonlar, bitkisel yağ, Aloe Vera, Vazelin veya hidro jel, gliserin, bitkisel yağ, emülgatörler, su ve bunların karışımlarını içerir. Tercihen, suda taşınan formülasyonlar, uygun formülasyon içinde çözündürülmüş yaklaşık% 0.1 ila% 60, daha tercihen% 4 ila 30 ve en çok tercihen% 6 ila 12 (w / w) Inula viskoz özütü içermektedir. Bir su olmayan formülasyon tercihen yaklaşık% 0.1 ila% 50 ve en çok tercihen% 5 ila% 30'u içerir. Bu buluşa göre, yabani ıslah edilmemiş Inula viscosa bitkisi, kimyasal bileşenlerinin dağılımıyla karakterize edilen saf özlerin optimize edilmiş miktarlarını veren yeni bir endüstriyel proseste yetiştirilebilir ve ekstrakte edilebilir. Dolayısıyla mevcut buluş, ekstrakte edilen aktif maddenin optimize edilmiş miktarlarını ve tahmin edilebilir kalitesini elde etmek için sıkı gözetim altında yetiştirilen bir Inula viscosa bitkisini açıklamaktadır. Yeni ekstraksiyon ekstraksiyon solventi olarak etil asetat kullanılarak yapılır. Elde edilen ekstre, benzersiz HPLC, LR ile karakterize edilir. GC-MS spektrumu. Ekstraksiyonun çıkarma aracı olarak etil asetat kullanılarak gerçekleştirildiği gerçeğine göre, GRAS olarak kabul edilir (Genel olarak Güvenilir olarak anılacaktır) ekstrakt gıda, farmasötik veya kozmetik formülasyonlardaki herhangi bir geleneksel formülasyonun bir parçası olarak kullanılabilir. Bir bitki olarak Inula viscosa'nın tanıtılması ve ekimi, ekotip taramasını çeşitlendirmek, sürgünleri kesime kesmek, bahsedilen kesitlerin alt ucunu daldırmak için farklı bölgelerdeki vahşi doğada yetişen bitkilerden alınan filizlerin ve dalların seçici bir koleksiyonunu içermektedir 4,000 PPM konsantrasyonda sıvı IBA köklendirme hormonu veya toz haline getirilmiş IBA T-8 köklendirme hormonu veya eşdeğerleri, kesitleri 4,5 santimetre veya benzer bitki saksılarının içinde saksılara dikmek, öğütülmüş hindistancevizi ve eşit polistiren köpük parçacıkları ile doldurulmuş Hacimsel parçalar veya eşdeğer dikim altlığı. Dikilen çömlekler, 22 ° - 25 ° C sıcaklık aralığını muhafaza eden sıcak bir masanın üzerine yerleştirildi, sıcak masa, gölgeleme ağından yapılmış bir çatıya sahip, yarı gölgeli bir kreş serasında bulundu, dikilen çömlekler, 20 dakikalık aralıklarla 1,5 saniye boyunca suya ince bir buhar püskürtüldüğü kontrollü sisleme. Bitkiler kreşte 3-4 hafta boyunca veya köklerin çömlek alanını büyüleyene kadar kaldı. Bitkiler o zaman kreşten damlama sulama sisteminin önceden bulunduğu sürülmüş bir tarıma taşınmıştır. Bitkiler, arazi birimi başına biyolojik kütleyi en yükseğe çıkarmak için 30 ila 60 cm standart aralıklarla ekilmiş ve nakilden sonra kök salmayı desteklemek için 1.000 metrekare başına 60 metreküp su ön sulaması uygulanmıştır. Sahada 2-4 hafta sonra, genç Inula viscosa bitkilerinin tepeleri, bitkilerin biyokütle üretimini arttırmak için bitkiden dallanmayı teşvik etmek için kesildi. Bir bitki olarak yetiştirilen Inula viscosa'nın işlenmesinin, zemine veya zemine yerleştirilen sulama boruları boyunca bulunan deliklerden damlayan su vasıtasıyla sulamayı içerdiğini, biyolojik kütlenin en hızlı büyümesinin sulamanın bitki su buharlaşması için 1: 1. Kontrollü bir sulama oranı elde etmek için toprak nem göstergeleri sahaya yerleştirilir, toprak ıslaklığının okumaları göstergelerden damlayan tüp sistemi vasıtasıyla sulama miktarını ve sıklığını komuta eden bilgisayar kontrollü bir sulama sistemine iletilir, Bitki buharlaşmasına karşı 1: 1'in altındaki sulama hızının biyolojik yığın büyüme oranını düşürdüğü ve daha fazla bio kütle artışının erken sona erdirilmesine neden olduğu açıklanmaktadır. Ayrıca sulama suyunda çözülmüş azot gübrelemesinin her 3 haftada bir 1.000 metrekare başına 15 kilogramlık bir oranda verilmesinin bitkilerin en hızlı büyüme ve biyolojik yığın birikimi ile sonuçlandığı açıklanmaktadır. Yukarıda bahsedilmeyen bu işlemler ve diğerleri gübrelenmemiş ve sulanan bitkilerin her birinin günde ortalama 15.1 gram büyümesine sebep olduğu ve gübrelenmemiş ve sulanmayan bitkilerde günde 1 ila 2 gram arasında bir ortalama büyümeye neden olduğu test edildi.Ayrıca, işlenmiş bitkilerin kuru yaprak biyo-kütlesi, muamele edilmemiş bitkilerin biyo-kütlelerinden yaklaşık iki kat daha fazla olduğu açıklanmıştır. Ayrıca ekim öncesi herbisit GOL 150 veya muadili ile muamelenin, muamele edilmemiş bitkilerle karşılaştırıldığında biyo kütle verimini% 30 arttırdığı açıklanmıştır. Hasat zamanı en yüksek hülasa verimi ve antioksidan etkinliği ile saptanmıştır. Hasatın genel süresi, bitkiler çiçek açmaya başlamadan önce. Ayrıca, yapraklardaki aktif muhteviyat konsantrasyonunu arttırmak için hasat işleminden bir hafta önce sulamanın durdurulduğu açıklanmaktadır. Bitki yapraklarına ya da havadaki parçalara uygulanan yağmur ya da sulamanın, Inula Viscosa'nın yapraklarını kaplayan koruyucu reçinenin suda çözünür bileşenlerini yıkadığı ve burada bu özel reçinenin önemli bir bölümünü oluşturduğu anlaşılmaktadır Ekstraktan. Dolayısıyla, böyle yıkama tüm ekstrakt verimi ve dolayısıyla biyolojik etkinliği azaltır. Dolayısıyla Inula Viscosa bitkisini Haziran, Temmuz, Ağustos, Eylül ve Ekim aylarında yaz aylarında ve sonbahar aylarında hiç yağmur yağmadığı uygun bir yerde yetiştirmek tercih edilir. Sonuç olarak, Inula viscosa yetiştirilen üç dönem, yani Haziran, Ağustos ve Ekim'de hasat edildi. Her hasat 1.000 m başına yaklaşık 1.300 kg yeşil biyokütle vermiştir 2 . Yetiştirilen Inula viscosa'nın hasat edilmesi, Inula viscosa bitkilerinin standart veya özelleştirilmiş bir baharat toplama kombinasyonuyla kesilmesini gerektirir, bitkiler, yerden 10-25 cm yükseklikte kesilir. Yaprakları, kesilmiş dalları veya tüm bitkiyi içeren elde edilen yeşil biyokütle, standart bir endüstriyel baharat kurutma tesisini kullanarak hızlandırılmış bir şekilde kurutulmuştur. Biyokütle, 50 ° C ila 65 ° C'de sıcak hava patlaması altında hareketli bir delikli konveyöre yerleştirilir. Kurutulmuş yaprakların nem içeriği yaklaşık% 4 ila% 8 olduğunda kuruma işlemi tamamlanmıştır. Kurumanın sonunda, yapraklar, kurutulmuş kütlenin tamamı dönen silindirlerin bir sistemi vasıtasıyla işlenerek saplardan ayrıldı, saplar atıldı ve kuru yapraklar hava akımı vasıtasıyla titreşen bir elekte ve kuru yaprakların bulunduğu bir boyutlandırma aparatına nakledildi. Kırılmış ve küçük parçacıklar halinde toplanmıştır. Tipik toz tanesi boyutu 50 ila 80 mesh arasındadır, toz haline getirilmiş Inula viscosa'nın tipik yığın yoğunluğu 0.37g / cm 3 bırakır . Alternatif olarak, hasat edilen malzemenin yavaş dehidrasyonu, açık havada kurutmayla da gerçekleştirilebilir, burada kesilen dalların ve bitkilerin ortam sıcaklığına, bağıl nemine ve malzemenin havalandırmasına bağlı olarak 2-5 gün boyunca iyi havalandırılmış kuru ve gölgeli bir platform üzerine yerleştirilir . Dehidrasyon için başka bir yol da kullanılmıştır. Kesilen dallar, yaklaşık 12 saatlik ilk dehidrasyon süresi boyunca geri kalan sapların üzerine tarlada bırakılmış ve bunu, hasat edilen bitkiler seçmek için tasarlanmış standart bir birleşim kullanılarak toplanmıştır. Hasat sonrası tarlada kalan bitkiler bir sonraki büyüme döngüsü boyunca yeniden üretilmekte ve büyümek üzere bırakılmakta, en iyi verim veren bitkilerden yeni sürgünler yeni bitkiler kesilmekte ve yukarıda tarif edildiği gibi yeni ekim alanlarına ekilmektedir. İlk yıl bitkiden elde edilen en iyi ekstrakte bitkilerin yaprakları, evcilleştirilmiş Inula viscosa türlerini daha da standartlaştırmak için doku kültürü yöntemi ile klonlanır. Standardizasyon işleminin kalite kontrolü, kimyasalların işaretleyici gruplarının içeriğini belirlemek için HPLC, GC MS ve TLC yöntemlerinin kullanımını içerir ancak bunlarla sınırlı değildir.Bulunan kimyasal gruplar; Flavenoids, Seskiterpenler, Tomentosin (Seskiterpen Laktonlar) ve Cartenoidler. Şekil 1, bu buluşa göre ekstrakte edilmiş bir Inula Viscosa ekstraktısının HPLC kromatogramını göstermektedir. Kromatogram (λ = 220nm), derivitization (sililasyon reaktifi - BSTFA) ve yukarıda belirtilen her bir kimyasal grup için dahili standart kullanılarak belirlenen birçok tepe gösterir. Flavanoidlerin miktarının tayininde bir quercetine standardı kullanılmıştır. Seskiterpenler için iç standart olarak nöotkaton, karoten tayini için β-karoten standardı kullanıldı. Şekil 2, çeşitli seskiterpenlerin gösterdiği türevlendirilmemiş Inula viscosa ekstraktının bir GC / MS kromatogramını göstermektedir; burada, 5 çeşitli seskiterpenin miktarının belirlenmesi Tablo 1'de verilmiştir. Flavonoidlerin toplam içeriğinin hasat zamanına doğrudan bağlı olduğu bulunmuştur Maksimum içerik bitkinin çiçeklenme evresinden bir ay önce bulunur. Analiz etil asetat ekstraktının% 34 seskiterpen,% 12.0 flavenoid ve yaklaşık% 0.53 karoten içermektedir. Tablo 1, GC / MS ve bunların nispi miktarları ile analiz edilen seskiterpen bileşenlerini listeler. Tablo 1: Sesquiterpen kısımlarının ve Inula viscosa özütün içeriğinin karakterizasyonu.
